Zanieczyszczenia semaglutydowe

Zanieczyszczenia semaglutydowe|Kontrola zanieczyszczeń symeglutydu|Niestandardowa synteza zanieczyszczeń i potwierdzenie struktury|Nauka-Peptyd

Kontrola zanieczyszczeń Soma Lutide (simeglutyd) - dla GLP-1 badanie jakości leku, zgłoszenie leku generycznego.Science-Peptide zapewnia niestandardową syntezę zanieczyszczeń związanych z Soma Lutide, w tym brakujących peptydów, utlenionych zanieczyszczeń, produktów złuszczania kwasów tłuszczowych, zanieczyszczeń związanych z łańcuchami PEG itp., wraz z danymi potwierdzającymi strukturę. Możemy wesprzeć Twoje badania profilu zanieczyszczeń. Zapraszamy do kontaktu z nami.

Semaglutyd (znany również jako Semaglutyd) cieszy się popularnością od lat. Novo Nordisk polega na tym, aby zwiększyć wartość rynkową drugiego na świecie, krajowego producenta generycznych peptydów, prawie na to nie zwracają uwagi. Doustna postać dawkowania i postać dawkowania do wstrzykiwań to duże rynki. Po wygaśnięciu patentu, kto pierwszy będzie mógł przeprowadzić badania jakościowe, kto będzie miał możliwość zdobycia pierwszego leku generycznego.

 

Jednak, szczerze mówiąc, badanie jakości somatostatyny jest trudniejsze niż w przypadku wielu peptydów. Jest to 31-peptyd z łańcuchem kwasu tłuszczowego (kwas oktadekanowy) i łącznikiem PEG. Ta struktura określa spektrum zanieczyszczeń, które jest szczególnie bogate w - brakujące peptydy, utlenione zanieczyszczenia, produkty wydalania kwasów tłuszczowych, zanieczyszczenia związane z łańcuchami PEG, dimery, każdy musi mieć kontrolę, każdy musi być klarowny. Zwłaszcza łańcuch PEG, którego nie ma w zwykłych peptydach, jest unikalny dla Somalutide.

 

Zgromadziliśmy duże doświadczenie w syntezie złożonych zanieczyszczeń peptydowych. Wyspecjalizowaliśmy się w badaniu somatostatyny i wiemy, jakie są trudności związane z jej profilem zanieczyszczeń i jakie są podstawowe elementy kontrolne. Możemy dostosować syntezę różnych kontroli zanieczyszczeń semaglutydowych do Twoich potrzeb, z danymi dotyczącymi potwierdzenia strukturalnego, a także pomóc w ustaleniu metody, dzięki czemu prawdopodobieństwo wydania suplementu podczas składania wniosku będzie mniejsze.

Struktura molekularna somatostatyny sprawia, że ​​jej profil zanieczyszczeń jest znacznie bardziej złożony niż w przypadku zwykłych peptydów. Kiedy przeprowadzamy badania zanieczyszczeń, koncentrujemy się głównie na następujących kategoriach:

Brakujący peptyd
31 aminokwasów, z których którykolwiek zostaje pominięty w procesie syntezy, jest zanieczyszczeniem. Czasy retencji brakujących peptydów w HPLC były szeroko rozłożone, z różną polarnością brakujących peptydów w różnych pozycjach. Niektórych brakuje na N-końcu, innych w środku, a jeszcze innych w pobliżu miejsca przyłączenia kwasu tłuszczowego. Otrzymaliśmy zamówienie od klienta, który poprosił o kilkanaście brakujących peptydów w różnych pozycjach, aby zlokalizować wszystkie możliwe brakujące zanieczyszczenia w ich procesie.

Zanieczyszczenia utleniające
Somalutyd ma w swojej sekwencji metioninę (Met), która jest podatna na utlenienie do sulfotlenku, a następnie do sulfonu. Utlenione zanieczyszczenia często pojawiają się w badaniach stabilności i rosną po pewnym czasie. Dokonaliśmy porównania, w warunkach przyspieszonych przez miesiąc pik utleniania może wzrosnąć do ponad 0,3%, bez kontroli.

Produkty wydalające kwasy tłuszczowe
Łańcuch boczny kwasu tłuszczowego (kwas oktadekanowy) somatostatyny jest przyłączony do lizyny poprzez łącznik, a modyfikacja ta może zostać częściowo usunięta podczas syntezy lub przechowywania. Bardziej problematyczne jest to, że wydzielanie może zachodzić w różnych miejscach - pomiędzy kwasem tłuszczowym a łącznikiem oraz pomiędzy łącznikiem a peptydem -, co powoduje różne zanieczyszczenia. Dla naszych klientów zsyntetyzowaliśmy kilka zanieczyszczeń-powiązanych z kwasami tłuszczowymi, począwszy od całkowitego wydalenia, a skończywszy na niewielkiej jego części.

Zanieczyszczenia związane z łańcuchem PEG-
Jest to najbardziej specyficzny rodzaj zanieczyszczeń w somatostatynie. Zawiera łącznik PEG (glikol polietylenowy), a łańcuch PEG może pękać, skracać się lub polimeryzować podczas syntezy, powodując szereg powiązanych zanieczyszczeń. Zanieczyszczenia te nie występują w zwykłych peptydach, ale są charakterystyczne dla somatostatyny i trudno je zbadać w badaniach jakościowych. Dokonaliśmy różnych wariantów delecji łańcucha PEG, skracania łańcucha PEG i utleniania łańcucha PEG.

Dimery/polimery
Dwie lub więcej cząsteczek somatostatyny skupia się razem, tworząc dimer lub wyższy. Masa cząsteczkowa dimeru jest dwukrotnie większa od głównego piku i często jest to szeroki pik w HPLC, dlatego należy go specjalnie oddzielić i oczyścić, zanim będzie można go zastosować jako kontrolę. Przygotowaliśmy dimery i osiągnięcie czystości przekraczającej 95% wymagało kilku rund oczyszczania.

Dezamidowane zanieczyszczenia
Asparagina (Asn) i glutamina (Gln) łatwo ulegają deamidacji w warunkach kwasowych lub podczas ogrzewania, w wyniku czego powstają izomery. W sekwencji somatostatyny występuje kilka Asn i Gln, a zanieczyszczenie deamidujące często pojawia się w teście wymuszonej degradacji, dlatego do zlokalizowania zanieczyszczenia należy zastosować produkt kontrolny.

Diastereoizomery
Podczas syntezy długich łańcuchów poszczególne aminokwasy mogą ulegać racemizacji, w wyniku czego powstają diastereoizomery. Zawartość tego rodzaju zanieczyszczeń zwykle nie jest wysoka, ale eksperci zapytają przy składaniu deklaracji i lepiej mieć przy sobie produkt kontrolny na potwierdzenie.

Wielu z tych zanieczyszczeń nie można kupić i należy je syntetyzować na zamówienie. Zrealizowaliśmy już wiele projektów z zakresu personalizacji zanieczyszczeń somatostatynowych, obejmujących wszystkie powyższe kategorie.

Usunięcie serii peptydów
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95%, z potwierdzeniem MS i NMR. Zsyntetyzowaliśmy zestaw peptydów z odstępem 5 aminokwasów od N-końca do C-końca.

Zanieczyszczenia utleniające
Met in Somatostatin is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. The purity of the product is >95% i możemy dostarczyć widmo LC-MS w celu potwierdzenia stopnia utlenienia. Sulfotlenek i sulfon oddziela się metodą HPLC i możemy zrobić jedno i drugie.

Produkty wydalające kwasy tłuszczowe
Na tym właśnie skupiają się zanieczyszczenia Somalutydu. Łańcuch kwasu tłuszczowego może zostać całkowicie lub częściowo usunięty. Możemy zsyntetyzować szereg wariantów dla różnych pozycji zrzucania. W jednym z najbardziej skomplikowanych projektów, jakie kiedykolwiek wykonaliśmy, klient poprosił nas o zsyntetyzowanie zanieczyszczenia zawierającego 6 atomów węgla w łańcuchu kwasów tłuszczowych, a zrobienie tego zajęło nam dwa miesiące.

Zanieczyszczenia związane z łańcuchem PEG-
To jedno z najtrudniejszych domieszek somatostatyny, a zarazem nasza siła. Może brakować łańcucha PEG, być skrócony, przerwany, utleniony i mogą być produkowane różne jego warianty. Zrobiliśmy zanieczyszczenie z całkowitym brakiem łańcucha PEG (tj. de-PEGylowaną somatostatyną), wariant z długością łańcucha PEG zmniejszoną o połowę i produkt z łańcuchem PEG utlenionym. Klient otrzymał te kontrole i w pełni ustalono spektrum zanieczyszczeń związanych z PEG.

Dimer
Dimery utworzone w wyniku-sieciowania lub-interakcji niekowalencyjnych można przygotować różnymi metodami, a następnie wyizolować i oczyścić w celu zapewnienia kontroli o wysokiej czystości. Oczyszczanie dimerów jest pracochłonne, ale mamy doświadczenie, aby wiedzieć, jak rozdzielić monomery.

Dezamidowane zanieczyszczenia
Dla miejsc Asn i Gln w sekwencji możemy przygotować dezamidowane kontrole zanieczyszczeń poprzez wymuszoną degradację lub ukierunkowaną syntezę. Różnica masy cząsteczkowej po deamidacji wynosi tylko 1, co nie jest łatwe do rozróżnienia za pomocą MS, dlatego do potwierdzenia zwykle używamy NMR lub specjalnych warunków chromatograficznych.

Dther niestandardowe zanieczyszczenia
Jeśli w swoich badaniach odkryjesz nowe nieznane zanieczyszczenie, możemy pomóc Ci przeanalizować strukturę i zsyntetyzować ją. Wyślij nam próbkę, wykonamy analizę LC-MS, spekulujemy strukturę, następnie syntezę kierunkową, a następnie porównamy czas retencji i widmo masowe, aby potwierdzić zgodność. Przeprowadzaliśmy ten proces wiele razy, a wskaźnik sukcesu jest dość wysoki.

Opracowanie i walidacja metod analitycznych
Podczas konfigurowania metody HPLC lub LC-MS wymagana jest kontrola zanieczyszczeń w celu lokalizacji, określenia rozdziału, weryfikacji zakresu liniowego i odzysku. Bez kontroli w walidacji metody brakuje jakiegoś elementu. Wielu klientów prosi nas, abyśmy najpierw wykonali kilka kluczowych domieszek w celu ustalenia metody, a następnie powoli uzupełnili resztę.

Heterogeniczna spektrometria mas
W przypadku deklaracji leku generycznego wymagana jest wszechstronna analiza jakościowa i ilościowa zanieczyszczeń procesowych i produktów rozkładu. Lokalizacja, zawartość i struktura każdego zanieczyszczenia muszą zostać potwierdzone produktem kontrolnym. Widzieliśmy oświadczenie o wysłaniu informacji w celu uzupełnienia, dziewięć razy na dziesięć jest to zanieczyszczenia w tym kawałku, których nie rozumiemy.

Badania stabilności
W długoterminowych-testach stabilności i przyspieszonych testach konieczne jest określenie, które produkty degradacji dominują i jaki jest trend w zawartości. Dzięki kontroli zanieczyszczeń możliwe jest dokładne określenie ilościowe i monitorowanie. Klient sprawdzał stabilność preparatu somatostatyny i stwierdził, że pik degradacji szybko rośnie w warunkach przyspieszenia, więc przeanalizowaliśmy go za pomocą MS i zsyntetyzowaliśmy w celu potwierdzenia struktury, a następnie klient poczuł ulgę, mogąc to zgłosić.

Testowanie zwolnienia partii
Po komercjalizacji każda partia API lub preparatu musi zostać przebadana pod kątem danej substancji. Kontrola zanieczyszczeń jest niezbędnym narzędziem do badania uwalniania.

Informacje dotyczące deklaracji leków generycznych
Badania zanieczyszczeń stanowią kluczową część informacji zawartych w zgłoszeniu. Zapewnienie pełnego profilowania zanieczyszczeń i danych kontrolnych znacznie zmniejsza ryzyko publikacji recenzji.

Przypadek 1: Firma farmaceutyczna, program leków generycznych Somalutide
Opracowują generyczną wersję somatostatyny i potrzebują pełnego zestawu kontroli zanieczyszczeń do walidacji metody. Dostosowaliśmy dla nich 15 zanieczyszczeń: 6 brakujących peptydów, 2 utlenione zanieczyszczenia, 1 dimer, 2 produkty złuszczania kwasów tłuszczowych, 3 zanieczyszczenia związane z łańcuchami PEG i 1 zanieczyszczenie deamidujące. Czystość każdego z nich przekraczała 95%, zgodnie z danymi MS i NMR. Kierownik projektu powiedział: „Zanieczyszczenia Somalutydu są bardziej skomplikowane niż inne peptydy, zwłaszcza PEG, którego szukaliśmy od wielu firm, ale wszyscy mówili, że nie mogą tego zrobić. Ale udało ci się to wszystko zrobić, a dane były kompletne, co było bardzo pomocne”. Następnie pomyślnie zakończono walidację ich metody i obecnie przygotowują się do zgłoszenia.

Przypadek 2: CRO, specjalne badanie dotyczące zanieczyszczeń w łańcuchu PEG
Podjęli się wysokiej jakości projektu badawczego dotyczącego somatostatyny, który wymagał kompleksowej analizy zanieczyszczeń związanych z łańcuchem PEG. Systematycznie syntetyzowaliśmy zanieczyszczenia związane z PEG-: całkowity brak łańcucha PEG, zmniejszenie o połowę długości łańcucha PEG, utlenianie końców łańcuchów PEG i rozbicie łańcucha PEG na dwie części. zsyntetyzował w sumie 8 zanieczyszczeń związanych z PEG-. Klient wykorzystał te kontrole do ustalenia pełnego zestawu metod wykrywania zanieczyszczeń PEG, co stało się najważniejszym elementem jego danych archiwalnych.

Przypadek 3: Badania stabilności, firma biotechnologiczna
Przeprowadzali badanie stabilności preparatu somatostatyny i odkryli, że zawartość produktu degradacji szybko wzrastała w przyspieszonych warunkach, ale nie wiedzieli, co to jest. Przeanalizowaliśmy próbkę za pomocą LC-MS, zakładając, że jest to zanieczyszczenie wydzielające kwasy tłuszczowe w określonym miejscu, a następnie zsyntetyzowaliśmy je w ukierunkowany sposób i potwierdziliśmy to przez porównanie. Opracowali test wykorzystujący tę kontrolę i dokładnie monitorowali trend tego produktu degradacji. Później, przy składaniu raportu, eksperci zaakcentowali tę część danych i ze względu na rzetelność danych nie przyznano żadnej rekompensaty.

Somatostatyna to bardzo popularny produkt, ale badanie zanieczyszczeń to delikatne zadanie, zwłaszcza zanieczyszczeń związanych z łańcuchami PEG i produktów złuszczających kwasy tłuszczowe, z którymi wielu producentów nie jest w stanie sobie poradzić. Jeśli prowadzisz badania jakościowe lub ogólny rozwój somatostatyny i potrzebujesz kontroli zanieczyszczeń, zapraszamy do rozmowy z nami. Wykonaliśmy dużo pracy, wiemy, jakie są trudności i wiemy, jak je pokonać.