Zanieczyszczenia retatrutydowe

Zanieczyszczenia retatrutydowe|Odniesienie do zanieczyszczeń rytaglutydem|Niestandardowa synteza zanieczyszczeń i weryfikacja struktury|Nauka-Peptyd

Kontrola zanieczyszczeń rytaglutydem - na potrzeby opracowywania metod analitycznych, badań jakości, zgłaszania leków generycznych Nauka-Peptide zapewnia niestandardową syntezę zanieczyszczeń związanych z rytaglutydem, w tym brakujących peptydów, utlenionych zanieczyszczeń, opadu kwasów tłuszczowych, dimerów itp., z danymi potwierdzającymi strukturę na poparcie badań profilowania zanieczyszczeń. Zapraszamy do kontaktu z nami. Zapraszamy do kontaktu z nami.

Retatrutide Impurities (Retatrutide) zyskał na popularności w ciągu ostatnich dwóch lat, triagonista GLP-1/GIP/glukagon, a jego działanie odchudzające jest jeszcze silniejsze niż w przypadku symeoglutydu. Gapią się na to krajowe firmy produkujące generyczne peptydy, patent wkrótce wygaśnie, kto pierwszy zgarnie pierwszy lek generyczny, który będzie mógł pożreć dużą część rynku.

 

Jednak przy wytwarzaniu leków generycznych podstawą są badania jakościowe. Analiza widma zanieczyszczeń, produkty do kontroli zanieczyszczeń, walidacja metod, żadnego z nich nie może zabraknąć w informacjach o zgłoszeniu. Retarotid to duży peptyd składający się z 39 aminokwasów i dwóch łańcuchów bocznych kwasów tłuszczowych. W procesie syntezy może powstać więcej zanieczyszczeń niż w przypadku zwykłych peptydów. - brakuje im peptydów, utlenionych zanieczyszczeń, dimerów, produktów wydalania kwasów tłuszczowych, z których każdy musi zostać sklarowany.

 

W Science-Peptide zgromadziliśmy duże doświadczenie w syntezie złożonych zanieczyszczeń peptydowych. Dysponujemy zestawem procesów przygotowania zanieczyszczeń specjalnie dla modyfikowanych peptydów o długich łańcuchach, takich jak rytaglutyd. Możemy dostosować syntezę różnych kontroli zanieczyszczeń rytaglutydem do Twoich potrzeb, korzystając z danych potwierdzających strukturę, a także pomóc w ustaleniu metody, dzięki czemu będziesz miał jasny pogląd podczas składania zgłoszenia.

Ritaglutyd jest dużą cząsteczką, proces syntezy jest złożony i źródło zanieczyszczeń również jest złożone. Kiedy przeprowadzamy badania zanieczyszczeń, koncentrujemy się głównie na następujących kategoriach:

Brakujący peptyd
Najczęstszym zanieczyszczeniem procesowym jest-niedostateczne sprzęganie jednego lub kilku aminokwasów podczas syntezy. Różne pozycje brakującego peptydu mają różną polarność i należy je zlokalizować za pomocą HPLC. Na przykład, jeśli brakuje lizyny w pozycji 15 lub jeśli brakuje aminokwasu na końcu łańcucha kwasu tłuszczowego, czas retencji jest zupełnie inny, ale bez kontroli nie wiadomo, który jest pik.

Zanieczyszczenia utleniające
Met łatwo utlenia się do sulfotlenku, co zmienia jego polarność i wpływa na test czystości. Ponieważ Met występuje w sekwencji Retarotideu, istotnym elementem kontrolnym są utlenione zanieczyszczenia. Czasami utlenione piki pojawią się po pewnym czasie, więc musimy na to uważać.

Dimery/polimery
Podczas syntezy lub przechowywania dwie lub więcej cząsteczek łączy się ze sobą za pomocą wiązań dwusiarczkowych lub oddziaływań niekowalencyjnych-i stanowią one główne zanieczyszczenia w substancji. Podwojenie masy cząsteczkowej dimeru jest często dużym pikiem w HPLC i musi być kontrolowane.

Produkty wydalające kwasy tłuszczowe
Retarotyd zawiera dwa boczne łańcuchy kwasów tłuszczowych (np. kwasu oktadekanodowego), a modyfikacja ta może zostać częściowo usunięta podczas syntezy lub przechowywania, w wyniku czego kwas tłuszczowy-usuwa zanieczyszczenia. Struktura tego typu zanieczyszczeń jest na tyle odmienna od piku głównego, że jego zlokalizowanie wymaga specjalistycznej kontroli. Spotkaliśmy klienta przeprowadzającego badania stabilności, po miesiącu przechowywania pojawił się pik, a następnie odkryliśmy, że zawartość kwasu tłuszczowego spadła o połowę poniżej wartości szczytowej.

Dezamidowane zanieczyszczenia
Asparagina (Asn) i glutamina (Gln) łatwo ulegają deamidacji w warunkach kwaśnych lub ogrzewanych, tworząc izomery. Zanieczyszczenia te są często wykrywane w testach wymuszonej degradacji i należy je kontrolować.

Diastereoizomery
Podczas syntezy-długich łańcuchów poszczególne aminokwasy mogą ulegać racemizacji, w wyniku czego powstają diastereoizomery, które należy wykryć za pomocą chromatografii chiralnej lub specjalnych metod. Chociaż zawartość zwykle nie jest wysoka, eksperci zapytają o nią, gdy zostanie ona zadeklarowana.

Wiele z tych zanieczyszczeń nie jest dostępnych na rynku i należy je syntetyzować na zamówienie. Zrealizowaliśmy wiele projektów dotyczących dostosowywania zanieczyszczeń rytaglutydem i omówiliśmy powyższe kategorie.

Usunięcie serii peptydów
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 15 is missing, or the amino acid at the end of the fatty acid chain is missing. We can synthesize them according to your impurity profile, and the purity is usually >95% ze stwardnieniem rozsianym. Klient poprosił nas o zsyntetyzowanie zestawu 12 brakujących peptydów od N--końca do C--końca, a my wykonaliśmy je wszystkie.

Zanieczyszczenia utleniające
Met in Retarotide is oxidized to sulfoxide, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the control product in oxidized state. The purity of the product is >95% i możemy dostarczyć widmo MS w celu potwierdzenia stopnia utlenienia. Utlenianie jest procesem stopniowym i możemy osiągnąć dominację sulfotlenku przy niewielkiej liczbie-produktów ubocznych.

Dimer
Dimery utworzone w wyniku-sieciowania lub interakcji niekowalencyjnych-można przygotować różnymi metodami, a następnie wyizolować i oczyścić w celu zapewnienia kontroli o wysokiej czystości. Masa cząsteczkowa dimeru jest dwukrotnie większa od głównego piku, znanego za pomocą MS. Niektórzy klienci poprosili o dimer do walidacji metody, a my zapewniliśmy im czystość 98%.

Produkty wydalające kwasy tłuszczowe
Jest to zanieczyszczenie charakterystyczne dla Retarutyny. Łańcuchy kwasów tłuszczowych mogą zostać częściowo zerwane lub całkowicie oddzielone, co powoduje powstanie szeregu powiązanych zanieczyszczeń. Możemy syntetyzować różne warianty z brakującymi lub skróconymi kwasami tłuszczowymi, aby pomóc Ci określić lokalizację tych zanieczyszczeń. Najbardziej skomplikowany przypadek, jaki kiedykolwiek zrobiliśmy, miał miejsce, gdy klient poprosił nas o syntezę wariantu łańcucha kwasu tłuszczowego z brakującymi sześcioma atomami węgla, i zrobiliśmy to.

Dezamidowane zanieczyszczenia
Dla miejsc Asn i Gln w sekwencji możemy przygotować deamidowane kontrole zanieczyszczeń poprzez wymuszoną degradację lub ukierunkowaną syntezę. Różnica w masie cząsteczkowej po deamidacji wynosi tylko 1, zatem rozróżnienie ich za pomocą MS nie jest łatwe i konieczne jest zastosowanie specjalnych warunków chromatograficznych, które jesteśmy w stanie dopasować.

Inne niestandardowe zanieczyszczenia
Jeśli w swoich badaniach odkryjesz nowe nieznane zanieczyszczenie, możemy pomóc Ci przeanalizować strukturę i zsyntetyzować ją. Wyślij nam próbkę, wykonamy analizę LC-MS, spekulujemy strukturę, następnie syntezę kierunkową, a następnie porównamy czas retencji i widmo masowe, aby potwierdzić zgodność. Przeprowadzaliśmy ten proces wiele razy, a wskaźnik sukcesu jest dość wysoki.

Opracowanie i walidacja metod analitycznych
Podczas konfigurowania metody HPLC lub LC-MS wymagana jest kontrola zanieczyszczeń w celu sprawdzenia lokalizacji, separacji, zakresu liniowego i odzysku. Bez kontroli w walidacji metody brakuje jakiegoś elementu. Wielu klientów prosi nas, abyśmy najpierw wykonali kilka kluczowych domieszek w celu ustalenia metody, a następnie powoli uzupełnili resztę.

Heterogeniczna spektrometria mas
W przypadku deklaracji leku generycznego wymagana jest wszechstronna analiza jakościowa i ilościowa zanieczyszczeń procesowych i produktów rozkładu. Lokalizacja, zawartość i struktura każdego zanieczyszczenia muszą zostać potwierdzone produktem kontrolnym. Widzieliśmy oświadczenie o wysłaniu informacji w celu uzupełnienia, dziewięć razy na dziesięć jest to zanieczyszczenia w tym kawałku, których nie rozumiemy.

Badania stabilności
W długoterminowych-testach stabilności i przyspieszonych testach konieczne jest określenie, które produkty degradacji dominują i jaki jest trend w zawartości. Dzięki kontroli zanieczyszczeń możliwe jest dokładne określenie ilościowe i monitorowanie. Kiedy klient sprawdzał stabilność preparatu Ritaglutide, stwierdzono, że pik degradacji rośnie bardzo szybko w warunkach przyspieszenia, więc przeanalizowaliśmy go za pomocą MS i zsyntetyzowaliśmy w celu potwierdzenia struktury, a następnie klient z ulgą zgłosił to nam.

Testowanie zwolnienia partii
Po komercjalizacji każda partia API lub preparatu musi zostać przebadana pod kątem danej substancji. Kontrola zanieczyszczeń jest niezbędnym narzędziem do badania uwalniania. Bez tego nie da się stwierdzić, kto jest szczytem i ile wynosi.

Informacje dotyczące deklaracji leków generycznych
Badania zanieczyszczeń stanowią kluczową część informacji zawartych w zgłoszeniu. Dostarczenie pełnej analizy profilu zanieczyszczeń i danych kontrolnych może znacznie zmniejszyć ryzyko oceny kwestii odszkodowania. Ekspert, który deklaruje informacje, ma do dyspozycji pełny zestaw produktów do kontroli zanieczyszczeń, kompletne dane i dużo większą swobodę.

Przypadek 1: firma farmaceutyczna, program leków generycznych rytaglutyd
Opracowują generyczną wersję rytaglutydu i potrzebowali pełnego zestawu kontroli zanieczyszczeń do walidacji metody. Spersonalizowaliśmy dla nich 8 zanieczyszczeń: 3 brakujące peptydy, 2 zanieczyszczenia utlenione, 1 dimer, 2 produkty złuszczające kwasy tłuszczowe. Czystość każdego z nich przekraczała 95%, zgodnie z danymi MS. Lider projektu powiedział: „Nie możemy kupić tych zanieczyszczeń i szukaliśmy kilku firm, które nie mogą tego zrobić. Ale udało się wyprodukować je wszystkie, a dane były kompletne, co było bardzo pomocne”. Później pomyślnie zakończono walidację ich metody, uzupełniono także informacje w deklaracji.

Przypadek 2: Firma CRO, profilowanie zanieczyszczeń
Podjęli się wysokiej jakości projektu badawczego dotyczącego retalutydu, który wymagał kompleksowej analizy zanieczyszczeń procesowych. Wysłali nam próbki surowego peptydu, a my przeprowadziliśmy analizę LC-MS, wywnioskowaliśmy możliwe struktury kilku nieznanych zanieczyszczeń, następnie zsyntetyzowaliśmy je w ukierunkowany sposób, a następnie porównaliśmy czasy retencji i widma masowe, aby potwierdzić trzy nowe zanieczyszczenia. Klient wykorzystał te dane do poprawy widma zanieczyszczeń i przeszedł akceptację klienta. Później poprosili nas o wykonanie nieczystości innych gatunków.

Przypadek 3: Badania stabilności, firma biotechnologiczna
Badali stabilność rytaglutydu i odkryli, że ilość produktu degradacji gwałtownie wzrasta w warunkach przyspieszenia, ale nie wiedzieli, co to jest. Przeanalizowaliśmy próbkę za pomocą LC-MS i założyliśmy, że jest to zanieczyszczenie deamidujące w określonym miejscu Asn, a następnie zsyntetyzowaliśmy je w ukierunkowany sposób i potwierdziliśmy to przez porównanie. Opracowali test wykorzystujący tę kontrolę i dokładnie monitorowali trend produktu degradacji. Kiedy przedstawiono raport końcowy, dane były bardzo solidne.

Retalutide jest popularnym produktem, ale badanie zanieczyszczeń to delikatne zadanie. Brakujące peptydy, utlenione zanieczyszczenia, produkty złuszczania kwasów tłuszczowych wymagają specjalistycznych kontroli w celu lokalizacji i oznaczania ilościowego. Jeśli prowadzisz badania nad jakością lub generyczny rozwój rytaglutydu i potrzebujesz kontroli zanieczyszczeń, nie wahaj się z nami porozmawiać. Wykonaliśmy mnóstwo pracy, wiemy jakie zanieczyszczenia są trudne i wiemy jak je wydobyć.