Synteza glikopeptydów|Glikozylowane peptydy|O-Połączone glikopeptydy|N-Połączone glikopeptydy|Nauka-Peptyd
Metaopis
Potrzebujesz glikopeptydów do badań glikobiologicznych lub mimikry glikoprotein? Nauka-PeptideGlycopeptyd Synteza obejmuje wiązanie O-, wiązanie N- i wprowadzanie złożonych glikanów. 20 lat doświadczenia, precyzyjna kontrola miejsc glikozylacji. Prosimy o kontakt z nami.
Glikopeptydy: symulowanie glikozylacji-w świecie rzeczywistym
Dlaczego robisz glikopeptydy?
Białka rzadko są „nagie” w organizmie. Większość z nich zawiera cukry. Glikozylacja wpływa na zwijanie, stabilność, rozpoznawanie i sygnalizację białek. Jeśli chcesz zbadać funkcję glikoproteiny lub opracować przeciwciało przeciwko epitopowi glikanu, nie wystarczy mieć nagi peptyd, musisz dołączyć glikany.
Trudność syntezy glikopeptydów polega na złożonej strukturze samego łańcucha glikanu i konieczności zapewnienia prawidłowego miejsca i integralności łańcucha glikanu po przyłączeniu do peptydu; O-koniugacja jest w porządku, ale N-skoniugowane łańcuchy glikanów są znacznie dłuższe, co powoduje, że trudność syntezy jest bezpośrednio dwukrotnie większa. Wchodziliśmy już w te dziury i wiemy, jak je ominąć.

Co możemy zrobić
1. Typ glikozylacji: powstają zarówno wiązania O-, jak i N-
|
Typ |
Metoda połączenia |
Typowe glikokoniugaty |
Robiliśmy sytuacje, w których |
|
O-połączone glikopeptydy |
Cukier-połączony z grupą hydroksylową łańcucha po stronie Ser/Thr- |
GalNAc, GlcNAc, Gal, Man |
Zrobiłem monosacharydy na pentasacharydy i mam stabilną wydajność |
|
N-połączone glikopeptydy |
Cukier-połączony z amidem-łańcucha bocznego Asn |
GlcNAc, typ bogaty w mannozę, typ złożony |
Najdłużej, jaki kiedykolwiek zrobiłem, to dziewięć cukrów, co wymaga specjalnych strategii ochronnych |
|
Zakwaszenie śliny |
z kwasem sialowym na końcu |
naśladując naturalne miejsca rozpoznawania glikoprotein |
Kwas sialowy łatwo odpada. Zoptymalizowaliśmy warunki |
W zależności od celów badawczych zaproponujemy, która strategia glikozylacji będzie najodpowiedniejsza. Pierwszym krokiem w syntezie glikopeptydów jest wybór odpowiedniego łańcucha cukrowego i wiązania.
2. Długość łańcucha cukrowego: od monosacharydów do złożonych łańcuchów cukrowych
Modyfikacja monosacharydów: GlcNAc, GalNAc, Man, Gal itp., najprostsza i najskuteczniejsza.
Disacharydy/trisacharydy: np. laktoza, chitozan, muszą być dobrze chronione przez donory glikozylu.
Złożone łańcuchy cukrowe: wysokomannozowe, złożone N-glikany, do dziewięciu cukrów.
Sialilacja: Końcowe wiązanie z kwasem sialowym naśladuje miejsce rozpoznawania naturalnych glikoprotein.
3. Kontrola punktowa: precyzja, bez zgadywania
Jaka jest największa obawa przed glikozylacją? Glikokoniugacja w niewłaściwym miejscu lub jedno miejsce jest połączone, ale drugie nie. Dzięki naszej ortogonalnej strategii ochrony możemy wprowadzić glikozylację w określonym miejscu i pozostawić inne miejsca nienaruszone. Chcesz glikozylować wiele miejsc? Możemy je wprowadzać jeden po drugim i wyraźnie kontrolować.
4. Czystość: w zależności od wymagań eksperymentalnych
|
Poziom czystości |
Obowiązujące scenariusze |
|
Konwencjonalna czysta (85-95%) |
Połączenie eksperymentalnego, aktywnego pierwotnego badania przesiewowego |
|
Wysoka czystość (95-98%) |
eksperymenty komórkowe, walidacja funkcjonalna |
|
Ultrapure (>98%) |
badania strukturalne, NMR, krystalografia |
Do każdego glikopeptydu dołączone są raporty HPLC i MS, zawierające dane potwierdzające integralność łańcucha glikanu i prawidłowe miejsce.
5. Inne modyfikacje glikopeptydów
Glikopeptydy same w sobie są wystarczająco złożone, ale niektóre eksperymenty wymagają czegoś innego:
Znakowanie fluorescencyjne: FITC, TAMRA, śledzenie miejsca docelowego glikopeptydu.
Biotyna: pociągnij-lub przetestuj.
Fosforylacja: jednoczesna symulacja glikozylacji i fosforylacji w celu zbadania przesłuchu.
Znakowanie izotopów: do oznaczania ilościowego NMR lub spektrometrii mas.
Dlaczego warto wybrać naszą usługę syntezy glikopeptydów?
1. Glikochemia + synteza peptydów, podejście dwu-kierunkowe
Synteza glikopeptydów jest trudna, ponieważ przekracza dwie dziedziny: - glikochemię i syntezę peptydów. Ci, którzy wytwarzają cukier, mogą nie znać peptydu, a ci, którzy wytwarzają peptyd, mogą nie znać cukru. Mamy ludzi po obu stronach, sami przygotowujemy donora glikozylu, sami optymalizujemy warunki glikozylacji, nie musimy zlecać tego podmiotom zewnętrznym i sami możemy rozwiązać problemy.
2. Elastyczne strategie ochrony i integralność łańcucha cukrowego
Podczas glikozylacji sam łańcuch cukrowy musi być chroniony, w przeciwnym razie warunki reakcji wyeliminują cukier. Mamy różne kombinacje grup zabezpieczających, które mogą stabilizować łańcuch cukrowy w warunkach syntezy peptydów, a następnie pozostawić cukier nienaruszony, gdy zostanie on odbezpieczony w ostatnim etapie.
3. Kontrola lokalizacji: łącz się gdziekolwiek chcesz
Glikozylacja jednomiejscowa: Cukier jest wprowadzany w określonym miejscu i pozostawiany bez zmian w innym miejscu.
Glikozylacja z wieloma-miejscami: różne miejsca mogą przenosić różne łańcuchy cukrowe, które można wprowadzać jeden po drugim, nie zakłócając się nawzajem.
Selektywna glikozylacja: istnieje wiele Ser/Thr, tylko jeden z nich jest glikozylowany -, co można osiągnąć dzięki strategii konserwacji, a nie prawdopodobieństwu.
4. Kontrola jakości: Czy łańcuch cukrowy jest nienaruszony? Czy strony są prawidłowe?
Glikopeptydy są bardziej kłopotliwe w kontroli jakości niż zwykłe peptydy:
Masa cząsteczkowa MS: patrząc na nią, można stwierdzić, czy cukier jest przyłączony, czy nie.
MS/MS, aby zobaczyć miejsce (opcjonalnie): rozbić peptyd, aby zobaczyć, do jakiego aminokwasu jest przyłączony cukier.
HPLC, aby sprawdzić czystość: Poszukaj również zanieczyszczeń powstałych w wyniku odcukrzenia.
Analiza składu cukru: Pomiar składu łańcucha cukrowego i połączeń, jeśli to konieczne.
Dane dotyczące każdego glikopeptydu są podawane do Ciebie, więc nie musisz zgadywać.
5. Od miligramów do stu miligramów, aż do końca
Miligramy na fazę przesiewową, dziesięć miligramów na fazę walidacji, sto miligramów na badanie strukturalne -, możemy wziąć to wszystko. Ten sam projekt, ten sam odpowiednik, nie ma potrzeby ponownej-harmonizacji.
Do czego można stosować glikopeptydy?
|
Obszary badawcze |
Typowe zastosowania |
Typ glikozylacji |
|
Glikobiologia |
Badanie, jak białka-wiążące cukier rozpoznają cukier |
Połączenie O-, połączenie N- |
|
Rozwój przeciwciał |
przesiewowe przeciwciała przeciwko epitopom glikanowym |
złożone łańcuchy cukrowe, zakwaszenie śliny |
|
Rozwój szczepionek |
antygeny szczepionek-skoniugowanych z cukrem |
powtarzalne jednostki cukrowe, sprzęganie glikopeptydów |
|
infekcje wirusowe |
naśladując wirusowe glikoproteiny powierzchniowe |
N-połączony typ o wysokiej zawartości mannozy |
|
Markery nowotworowe |
nieprawidłowo glikozylowane peptydy |
krótkołańcuchowe-cukry O- |
|
ścieżki sygnalizacyjne |
mechanizmy, dzięki którym glikozylacja wpływa na funkcję |
Modyfikacja monosacharydów |
|
biologia strukturalna |
NMR lub struktury krystaliczne glikoprotein |
jednorodne łańcuchy cukrowe, znakowanie izotopowe |
Biologia strukturalna NMR/struktura krystaliczna jednorodnych łańcuchów cukrowych glikoprotein, znakowanie izotopowe
Dostawa i kontrola jakości
- Dostawa: Liofilizowany proszek, probówki wirówkowe lub fiolki, zabezpieczone azotem.
- Dokumenty towarzyszące: COA (profil HPLC + profil MS), MS/MS (potwierdzenie miejsc glikozylacji).
- Badania opcjonalne: zawartość peptydów, endotoksyny, wilgotność, analiza składu cukrów.
- Indywidualne opakowanie: porcjowanie i znakowanie zgodnie z Twoimi wymaganiami.
- Każdy produkt syntezy glikopeptydów jest dwukrotnie-sprawdzany przed wysłaniem, aby upewnić się, że łańcuch cukrowy jest kompletny i miejsca są prawidłowe.



Trzy przypadki-z życia wzięte
Przypadek I: Instytut Glikobiologii
Klient potrzebuje O-glikopeptydu, który jest przyłączony do GalNAc w określonym miejscu, do badania rozpoznawania lektyn. Zastosowaliśmy syntezę-na fazie stałej+glikozylację i modyfikację, a ostatecznie MS/MS potwierdziło, że glikopeptyd był przyłączony do określonego Ser. Klient użył tego glikopeptydu do SPR i uzyskał stałą wiązania.
Przypadek 2: Programy szczepionek międzynarodowych firm farmaceutycznych
The customer needed a batch of N-linked glycopeptide with high mannose-type sugar chain for anti-HIV vaccine research. We prepared the glycosyl donor by ourselves, optimized the glycosylation conditions, and delivered the final batch of N-linked glycopeptides with intact glycan chains and purity >95%, więc kolejne eksperymenty immunizacyjne klienta przebiegły pomyślnie.
Przypadek 3: Badania markerów nowotworowych na uniwersytecie krajowym
Klient potrzebował glikopeptydu zawierającego sialilowany antygen T-, który naśladowałby nieprawidłową glikozylację na powierzchni komórek nowotworowych. Wprowadziliśmy sialilowany GalNAc i zadbaliśmy o to, aby kwas sialowy nie został utracony podczas procesu syntezy. Klient zastosował ten glikopeptyd do badania przesiewowego pod kątem specyficznych przeciwciał.
A co z Twoim zapotrzebowaniem na glikopeptydy?
Niezależnie od tego, czy potrzebujesz prostych glikopeptydów modyfikowanych monosacharydami, czy złożonych N-glikanów, możemy porozmawiać. Przynajmniej nie musisz szukać kogoś po obu stronach, kiedy prosisz Science-Peptide o wykonanie syntezy glikopeptydów.
Musisz mi powiedzieć:
sekwencje peptydowe
Miejsca glikozylacji i struktury łańcuchów cukrowych (najlepiej referencje)
Ile (miligramy)
wymagania czystości
Kiedy tego chcesz?
W ciągu 24 godzin otrzymasz ocenę wykonalności i wycenę.